蛋白表达纯化


使用分子生物学技术把目的基因连接到蛋白表达载体上，构建外源蛋白表达载体。利用合适的表达系统表达目的蛋白并对其进行纯化，为解析蛋白质冷冻电镜三维结构提供合格的样本

服务流程

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产品亮点

极速的产品周期
可为冷冻电镜三维结构解析提供高质量蛋白样本
从序列到结构的“一站式”服务降低运输对蛋白的影响

常见问题

（1）表达载体将外源基因导入宿主菌，指导宿主菌的酶系统合成外源蛋白；
（2）外源基因不能带有内含子；
（3）利用原核细胞的强启动子和SD序列等控制外源基因的表达；
（4）外源基因与表达载体连接后，必须形成正确的开放阅读框架；
（5）利用宿主菌的调控系统，调节外源基因的表达，防止表达的外源基因产物对宿主菌的毒害。


密码子优化是基因表达优化的关键步骤之一，基因序列GC含量比例不当、序列中的终止密码子、转录后mRNA的二级结构、核糖体结合位点以及密码子偏爱性等，这些都会影响到蛋白表达。

克隆载体：都有一个松弛的复制子，能带动外源基因在宿主细胞中复制扩增，用于克隆和扩增DNA片段（基因）的载体。
表达载体：具有克隆载体的基本元件（Ori、Ampr、Mcs等），还具有转录/翻译所必须的DNA序列的载体，用于将目的基因转录翻译成蛋白质。


载体比较大、低拷贝载体、背景不明确的载体、自杀性载体和抗性特殊的载体，亚克隆难度比较大。例如：pCAMBIA-1301、pBI121、pKSV7、pMG36e(红霉素抗性)和pCYT(氯霉素抗性)等

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