Cryo-EM单克隆抗体识别表位鉴定解决方案

基于SPA技术的单克隆抗体识别表位鉴定是什么?

概念

抗体识别表位即抗原表位,是由连续序列(蛋白质一级结构)组成或由不连续的蛋白质三维结构组成,决定抗原性的特殊化学基团,又称抗原决定簇,通常由5~15个氨基酸残基组成,根据其结构可分为线性表位和构象表位。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大,决定簇的数目越多。传统的抗原表位的鉴定方法主要有X-ray衍射技术、核磁共振技术、肽扫描技术、氨基酸定点突变技术、质谱技术、噬菌体展示肽技术及生物信息技术预测等。

X-ray衍射技术和核磁共振技术一直以来被称为抗原表位鉴定的金标准,然而决定细胞识别功能的膜蛋白、分子量大的抗原抗体复合物,由于难以结晶等原因,很难通过传统方法实现表位的鉴定。自上世纪70年代起,许多科学家尝试使用基于电子显微镜的方法来解决这个问题。2013年,水木未来电镜首席科学顾问,加州大学旧金山分校(UCSF)的程亦凡教授等将直接电子探测器用于冷冻电镜单颗粒分析(Sigle Particle Analysis,SPA)记录单颗粒图像,极大提高了信噪比与分辨率,是冷冻电镜技术发展的里程碑。冷冻电镜技术的持续突破为单克隆抗体识别表位的鉴定提供了更高效的新路径。

技术流程



你为什么需要抗体识别表位鉴定服务?



揭示了靶蛋白的真实结构





从抗原-抗体复合物结构上
解释不同抗体之间的差异性




鉴定出抗体识别的空间表位信息,
对抗体药申请专利保护、
延长市场保护期


揭示整个免疫反应过程中抗原抗体
动态复杂结构和功能机制,
针对靶蛋白进行下一代免疫疗法的
优化设计

为什么选择水木未来?

水木未来作为赛默飞亚太地区唯一战略合作伙伴,已建设完成亚洲首家以300kV顶配冷冻电镜为核心的商用结构解析平台,平台配备了G3 Titan Krios 、Talos L120C 、Vitrobot 和等离子处理器等配套设施,且G3 Titan Krios 电镜配备了先进的K3相机、球差矫正器和自动化单颗粒采集软件等,
可以提供领先的SPA结构解析服务:

无需对抗原-抗体复合物进行结晶

广泛适用于分子量较大的抗原蛋白、多次跨膜蛋白和富含糖基化修饰蛋白等

无需对蛋白进行序列截短改造

可基于稳定在去垢剂中或者组装在纳米磷脂盘(Nanodiscs)中的全长序列抗原蛋白进行表位鉴定

更接近真实内环境的空间结构

冷冻电镜能够在近自然、完全水合状态下解析抗原-抗体复合物的复杂动态结构或者多聚体结构,为进一步揭示部分成功的治疗性单克隆抗体药的作用机制提供了新途径,将有助于优化设计针对各类疾病靶点的下一代免疫疗法

业务流程

水木未来(北京)科技有限公司

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